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酵母双杂交筛选与组蛋白去乙酰化酶HDAC1相互作用的蛋白 06月12日

【摘要】由HDACs和HATs介导的组蛋白乙酰化异常是导致肿瘤产生的主要原因之一。本文意在通过构建真核细胞中表达的重组质粒pGBKT7-HDACl,在酵母双杂交系统中筛选HeLa基因组cDNA文库中与组蛋白去乙酰化酶1(HDACl)相互作用的蛋白,为更好地寻找治疗癌症的药物靶标打下基础。从癌HeLa细胞中用Trizol一步法提取总RNA,用Invitrogen反转录试剂盒进行反转录合成cDNA,利 […]

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Beclin1基因的选择性剪接研?#32771;?#26465;件敲除小鼠的建立 03月12日

【摘要】第一部分Beclin1基因的选择性剪接研究目的:研究儿童急性B淋巴细胞白血病697细胞系中的Beclin1基因的选择性剪接及其对自噬的调控作用。方法:(1)提取697细胞系的总RNA,逆转录成cDNA。(2)在Beclin1基因的ORF区的起始密码?#30001;?#28216;和终止子的下游设计引物,以cDNA为模板,进行PCR扩增、测序和比对。(3)?#27835;?#21098;接体Del-E11产生的?#32959;?#26426;制。(4)构建GFP-剪接 […]

蛋白?#39318;?#23398;结合生物学手段解析13-3-3ε相互作用复合物的研究 01月05日

【摘要】14-3-3蛋白质家族是一个在真核生物中广泛表达的28-33kDa的酸性蛋白质。从酵母到哺乳动物细胞都有14-3-3蛋白质的表达,并且结构和功能非常保守。在哺乳动物中有7个14-3-3亚型(isoform),分别是?#38534;ⅵ謾ⅵ摹ⅵ恰ⅵ襎和ζ,各个亚型由不同的基因编码。目前已报道有超过100个蛋白质与14-3-3相互作用,这些与14-3-3相互作用的蛋白质涉及到的生物学功能包括细胞周期调控、信 […]

禾谷缢管蚜体内与传播WYDV-GPV相关的蛋白的筛选?#22270;?#23450; 10月18日

【摘要】小麦病毒病是全球冬小麦产区小麦上经常发生的一类重要病害,由黄矮病毒(yellowdwarfviruses,YDVs)单一侵染或混合侵染引起。黄矮病毒经由多?#33268;?#34460;以持久型方式传播。病毒-蚜虫的互作关系成为病毒-蚜虫-小麦这一病害体系中的关键因素。病毒编码的?#38142;?#30456;关蛋白和蚜虫体内参与病毒传播的蛋白之间的互作是病毒-蚜虫互作关系的?#32959;?#35777;据,而参与传播黄矮病毒相关的蚜虫蛋白都停留在正向遗传学手段的 […]

绵羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白与绵羊透明质酸酶2相互作用初探 10月06日

【摘要】研究背景?#22909;?#32650;肺腺瘤(Ovinepulmonaryadenomatosis,OPA)是由绵羊肺腺瘤病毒(Jaagsiektesheepretrovirus,JSRV)引起的一种传染性肺脏肿瘤性疾病。JSRV为p反转录病毒属成员,其env基因主要编码囊膜蛋白(JSRV-Env),包括表面蛋白(SU)和穿膜蛋白(TM)两个亚基。有研究表明,绵羊透明质酸酶2(hyaluronidase2,Hya […]

UGTs同源及异源寡聚体的形成对酶活性的影响及机理研究 07月31日

【摘要】尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶UGTs是一类非常重要的二相代谢酶,可以在内源物和外源物?#32959;由?#21152;入一个葡萄糖醛酸,增加极性,利于其经尿液与胆汁排泄,从而调节体内稳态。UGTs的单核苷酸多态性SNP广泛存在,可能引起一些内源性或外源性物质代谢行为的改变,从而引起各种疾病,如遗传性非结合性高胆红素血症(Gilbert综合征)就是由于患者的UGT1A1基因突变引起的。UGT1A和UGT2B成员间的相互 […]

TRIM29逆转P53突变型结肠癌奥沙利铂耐药及其机制的研究 07月27日

【摘要】第一部分pIRES2-ZsGreen1-TRIM29载体构建目的:构建pIRES2-ZsGreen1-TRIM29质粒表达载体方法:以pDONR223-TRIM29为基因模板,PCR扩增TRIM29CDS区片段,将PCR产物进?#26143;?#33026;糖凝胶电泳,并回收TRIM29条带。用BglⅡ、EcoRI将回收的TRIM29的PCR片段及目的载体pIRES2-ZsGreenl双酶切,然后进行连接。将重组质 […]

东方田鼠抗日本血吸虫童虫的相关基因作用机制的初步研究 07月04日

【摘要】血吸虫病是一种严重危害人民身心健康的人兽共患寄生虫?#28304;?#26579;病,在我国仍然是一个重要的公共卫生问题。流行病学调查和人工感染实验研究结果表明:东方田鼠Microtusfortis)是日本血吸虫的非适宜宿主,也是唯一一种对日本血吸虫具有天然抗性、感染血吸虫后不致病的哺乳动物。在前期实验的基础上,本研究通过蓝色琼脂糖凝胶亲和层析,直接从东方田鼠血清中分离、纯化获得了一个对日本血吸虫童虫具有显著杀伤作 […]

乙型肝炎病毒X蛋白诱发肝细胞恶性转化机制的定量蛋白组学研究 06月18日

【摘要】原发性肝细胞癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)是世界范围内恶性肿瘤中发病率居第五、致死率居第三的恶性疾病。每年全世界约有700,000例新增患者,其中?#34892;?#21457;病?#35797;对?#39640;于女性,且主要集中于东南亚地区以及非洲撒哈拉沙漠?#38405;?#21306;域,呈现显著的地域性分布。中国大陆地区HCC患者数量占全世界患者数量的50%,其中?#34892;?#21457;病率为35.2/100,000,女性发病率为13.3/10 […]

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